從19年底疫情開始到現在,如果有一個行業實現乘風波浪,那一定就是醫藥行業。從疫情初期的醫療防護用品的緊俏,到中期疫苗的研發與全民接種,直到現在的常態化核酸檢測,無一不是在推動醫藥行業的發展。其中生物藥憑借其藥理活性高、特異性強、治療效果好、毒副作用較小的特點,已在全球醫藥市場大放異彩。
在生物藥制備中離不開細胞培養,培養基將為細胞生長提供所需基本物質,并且其物質組成會影響產品的產量和結構,所以對培養基的篩選尤為重要。
如何高效分析細胞培養基質
細胞培養基質中一般都含有氨基酸、維生素、碳水化合物、無機鹽、多肽、蛋白質和其他類化合物。細胞生長過程中會消耗營養物質,同時釋放目標生物藥物和廢棄產物。
氨基酸作為蛋白質的基礎,同時也是許多代謝途徑的中間介質。是培養基中的必須成分,為細胞增殖和生存提供原料,其濃度可影響細胞密度。監測和調整氨基酸的組成對于優化生產過程,保證終產物的高質量和高產量是很有必要的。
我們提供一種高效、快速的HPLC-柱后衍生法,利用陽離子交換色譜結合茚三酮柱后衍生法可檢測對包括細胞培養基質在內許多復雜基質中的氨基酸進行分析。
HPLC-柱后衍生法
圖1:流程圖
● 快速:ONYX PCX 搭載可程序升溫柱溫箱,可實現30min快速檢測幾十種氨基酸;
● 重復性高:柱后衍生方法具有很好的靈敏性、重復性和穩定性;
● 操作簡便:直接與HPLC連用,基質中的大部分化學物質不會干擾分析,分析前只需檸檬酸鹽緩沖溶液稀釋樣品并過濾;
● 提供應用方案。
圖2:細胞培養基樣品色譜圖
該方法已經成為并且將一直是實驗室測試生物樣品、蛋白質和多肽以及食品分析的重要方法。